耐高温α－淀粉酶作为啤酒酿造工艺的主要食品添加剂之一，酶活力值的检测对酿造工艺的制定起着非常重要的作用。其正确检测应严格遵照GB/T24401-2009《α－淀粉酶制剂》的要求执行。

一、准备工作：

⒈所有试验用器具必须洗净干燥，尤其避免淀粉、硫代硫酸钠等试剂的污染，以免影响显色结果。

⒉可溶性淀粉（同一样品的检测必须使用同一瓶试剂）于105±2℃鼓风干燥2h冷却至室温后按要求取用。

⒊按国标要求比例配制的磷酸缓冲溶液取一定量测pH值表明高于6.0。因而须按同比例配制柠檬酸溶液，于磁力搅拌状态以酸度计测定进行调整并记录所用柠檬酸溶液体积，掌握合理比例为以后调整缓冲溶液pH值节省时间、节约试剂。

⒋对恒温水浴设备、分光光度计和比色杯及吸量管等器具进行标定，以保证试验数据的准确。

 二、对国标文字的理解非常重要，标准中的加注一定要重视。（待测耐高温α－淀粉酶活力浓度控制在60～65u/ml）在具体实际工作中针对外购不同品牌的产品应采取具体的检测方案。

对两个品牌的产品进行检测酶活力的检测结果见表1，发现不同品牌的耐高温α－淀粉酶其酶活力范围虽符合国标规定，但具体≧20000u/ml的数值范围不尽相同，具体样品检测的稀释度须进行具体调整，不能只采用一个固定的稀释度。

表1          对两个品牌的产品进行酶活力的检测结果            

表1两个样品采用同一稀释度，A样由于酶活力数值较大，没有得到试验结果，给检测工作带来了不必要的损失。因此不能将稀释度固定在一个点上。对于已知酶活力数值范围的样品，根据其具体数值参照国标标注要求60~65u/ml的浓度计算好合理稀释度直接进行测定。未知酶活力样品须多稀释度进行分析筛选可行检测程序，各稀释度待测样品须分时段进行检测，防止多个样品同时进行反应时间掌握不准确而造成数据失实。

三、根据酶活力的定义，对同一样品不同稀释度的稀释样检测须分开进行。表2所示对B样进行检测时，由于反应时间和比色阶段的顺延，造成了该样品不同稀释度同时进行测定，所得酶活力值相差很大，影响检测结果的筛取。

表2     对同一样品不同稀释度的稀释样酶活力检测结果    

表2中1000/3.0倍稀释样的操作计时符合定义要求，其结果为真实测量值；其他五个稀释度的样品作为参照对比反应时间相对较长，不符合定义阐述的反应时间要求，所得检测值失真。

四、在实际工作中随样报告采用计量单位与标准不统一时，应采取相应措施换算至所需对应的数值后制定具体的检测方案。如Ａ样酶活力单位为u/g，取样后应将样品于20℃水浴中保温至恒温后称取1 ml样品的质量，将酶活力换算至u/ml具体数值后计算得到合理稀释度再进行检测，从而达到节省试剂并减轻工作强度的合理目标。